心肌梗死会严重危害人类和动物健康, 亟待提升其诊断速度和治疗效果。外泌体作为天然的细胞信息载体, 其包含的一些微小RNA (microRNA, miRNA) 能够反映或作用于心肌梗死所致病理变化, 进行有效诊治。本文就不同来源的外泌体miRNA作为心肌梗死诊断物(如miR-4516、miR-203和miR-1915-3p) 的可行性, 以及通过细胞凋亡(如miR-21a-5p、miR-30e和miR-210)、细胞自噬(如miR-125b-5p、miR-301和miR-143-3p)、细胞焦亡(如miR-182-5p、miR-133a和miR-100-5p) 和铁死亡(如miR-26b-5p和miR-23a-3p) 减缓细胞死亡, 促进新生血管的形成(如miR-29b-3p、miR-210-3p和miR-494-3p) 和抑制炎症反应(如miR-25-3p、miR-182-5p和miR-671) 等作用对心肌梗死进行干预治疗的研究进展进行了综述, 旨在为心肌梗死的诊断和治疗提供新策略。

虎杖苷(polydatin, PD) 是一种从虎杖根和茎中提取的天然活性单晶化合物, 为白芦藜醇的天然前体。本研究旨在探讨虎杖苷对尿酸钠结晶(monosodium urate, MSU) 诱导的小鼠痛风性关节炎的治疗作用及可能机制。所有动物实验程序均经过南京大学动物伦理委员会的审查与批准(批准号: 2407002)。采用足掌注射20 μL MSU (25 mg·mL^-1) 混悬液以构建小鼠痛风性关节炎模型, 考察虎杖苷对小鼠足掌病理变化的作用效果。给药组小鼠在造模前3天每天通过腹腔注射给予不同剂量(低剂量组: 5 mg·kg^-1; 中剂量组10 mg·kg^-1; 高剂量组20 mg·kg^-1) 虎杖苷处理。在MSU混悬液注射后第3、6、9、12和24 h测量小鼠足掌厚度并拍照记录。通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, H&E) 染色法染色观察小鼠足掌组织损伤情况。利用免疫组化及免疫荧光检测NLRP3及CASP1 p20表达情况以评估足掌组织NLRP3炎症小体活化情况。细胞水平采用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS) 联合三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)/MSU/尼日利亚菌素(nigericin) 构建NLRP3炎症小体细胞活化模型, ELISA检测虎杖苷处理对巨噬细胞内NLRP3炎症小体活化后白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β) 分泌的影响。流式细胞术检测巨噬细胞内CASP1 p20活化情况。免疫荧光检测巨噬细胞内NLRP3炎症小体组装情况。研究结果表明, 与模型组相比, 虎杖苷给药组小鼠足掌肿胀程度显著降低; H&E染色显示小鼠足掌组织损伤显著减轻, 表明虎杖苷对小鼠足掌损伤具有治疗作用。免疫组化及免疫荧光结果显示CASP1 p20及NLRP3表达显著降低, 表明虎杖苷显著抑制NLRP3炎症小体活化, 从而减弱小鼠足掌局部炎症反应。通过提取小鼠骨髓来源巨噬细胞并进行细胞水平相关实验, 发现虎杖苷处理后细胞内由NLRP3炎症小体活化介导的IL-1β分泌及CASP1 p20活化显著降低, NLRP3炎症小体组装受到抑制。综上所述, 虎杖苷可以通过抑制NLRP3炎症小体组装与活化, 减少IL-1β炎性细胞因子的生成与释放以发挥其抗炎作用, 从而减轻小鼠痛风性关节炎的关节损伤, 为痛风的治疗提供了新策略。

奥沙利铂(oxaliplatin, Oxa) 是进展期结直肠癌化疗常用药物, 然而多数患者在接受治疗后出现耐药, 相关耐药机制尚未完全阐明。本研究以结直肠癌细胞HCT116为对象, 通过药物浓度梯度诱导构建奥沙利铂耐药细胞株(HCT116/Oxa)。在此基础上基于蛋白质组学分析HCT116/Oxa细胞表达谱; 采用The Database for Annotation, Visualization, and Integrated Discovery (DAVID) 数据库进行基因本体(gene ontolog, GO) 分析; 利用GeneAnalytics数据库通路富集分析; 通过抑制剂、免疫印迹、siRNA技术揭示结直肠癌细胞对奥沙利铂耐药的潜在靶标及其机制。结果显示, HCT116/Oxa细胞对奥沙利铂的耐药指数为10.2。与HCT116相比, HCT116/Oxa对奥沙利铂表现出强的增殖潜能和抗凋亡能力。蛋白质组数据表明, HCT116/Oxa细胞717种基因表达改变, 上调399种, 下调318种。GO分析显示, 差异表达基因与氧化压力反应、铁代谢、脂质代谢、凋亡、细胞周期进展等生物学过程有关。通路富集显示, 细胞代谢、铁死亡、Nrf2-ARE信号、脂肪酸及谷胱甘肽代谢等通路显著变化。定量结果显示, 与铁死亡相关分子, 包括谷胱甘肽过氧化物酶4 (glutathione peroxidase 4, GPX4)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基(glutamate-cysteine ligase regulatory subunit, GCLM)、铁蛋白轻链(ferritin light chain, FTL)、铁蛋白重链(ferritin heavy chain, FTH1)、血红素氧合酶1 (heme oxygenase 1, HMOX1)、谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase, GSR) 和NADH脱氢酶1 (NADH dehydrogenase 1, NQO1) 的表达显著增加, 而长链脂肪酸-辅酶A连接酶(long chain fatty acid-CoA ligase, ACSL) 4和ACSL1的表达降低。功能研究表明, GPX4特异性抑制剂RSL3降低耐药细胞活力, 提高脂质过氧化水平, 增加亚铁离子和丙二醛含量, 降低谷胱甘肽(glutathione, GSH) 浓度。免疫印迹显示, HCT116/Oxa细胞中GPX4、FTH1、FTL、GSR表达增加, ACSL4降低。RSL3能够逆转GPX4、FTH1、FTL、GSR和ACSL4的水平。进一步发现, 敲低GPX4可降低耐药细胞活力, 提高脂质过氧化水平和降低GSH浓度, 表明GSH/GPX4通路介导的铁死亡抵抗是HCT116/Oxa对奥沙利铂耐药的潜在机制, 抑制GSH/GPX4通路是逆转结直肠癌对奥沙利铂耐药的途径。

细菌感染性疾病一直严重威胁着人类健康、动植物养殖产业发展及生态环境稳定。传统抗生素的广泛使用, 导致细菌耐药性问题日益严峻, 开发新型有效的细菌感染防治策略迫在眉睫。蛭弧菌作为一类以捕食细菌为生的寄生型细菌, 对多种致病菌具有裂解作用, 展现出防治细菌感染的潜力。但是, 直接使用蛭弧菌菌液或菌粉, 存在易流失、易被免疫系统清除、蛭弧菌活力难保持、使用顺应性差等问题。近年来, 工程化蛭弧菌技术为更精准、高效地利用蛭弧菌防治细菌感染带来了新的契机。本文调研了近年来工程化蛭弧菌防治细菌感染的研究进展, 重点介绍基于制剂设计、表面修饰、基因编辑的蛭弧菌工程化技术及其治疗应用, 为工程化蛭弧菌的研究发展提供参考。

抑郁症是一种常见的精神疾病, 具有高发病、高复发、高致残的特点, 在世界范围内造成了严重的社会和经济负担。其病因较为复杂, 且现有治疗方案较为有限。研究人员已建立了多种动物模型用于筛选和评价抗抑郁药物。本文综述了抑郁症的研究进展和典型的非临床动物模型, 总结了规范化抑郁症动物模型在非临床研究中需要注意的问题, 并对抗抑郁药物的非临床药效学评价体系的系统化和规范化提出建议。

神经退行性疾病是导致全球致死致残的重要原因之一, 发病机制复杂, 无有效治疗药物。越来越多的研究发现, 神经退行性疾病大都涉及铁稳态的异常以及脑内免疫细胞的激活。小胶质细胞的铁积累可促进铁死亡, 导致细胞功能障碍和死亡; 而抑制铁死亡的发生能缓解神经炎症, 保护神经元, 减缓疾病发展, 提示铁死亡与神经炎症在神经退行性疾病中发挥了关键作用。本文综述了铁死亡与神经炎症在神经退行性疾病中的作用, 进一步讨论了神经退行性疾病中调控铁死亡与神经炎症的相关靶点, 并总结了靶向铁死亡和神经炎症的药物在神经退行性疾病中的治疗潜力。通过本文的综述, 期望为神经退行性疾病的治疗提供新的靶点和治疗药物, 为其临床治疗提供新的思路, 改善神经退行性疾病的症状和预后。

口服益生菌易受胃肠道环境影响, 到达肠道的益生菌数目很少, 难以定植, 限制了益生菌疗法的应用。本研究选择常见益生菌——鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus, LGG) 作为模型, 制备了鼠李糖乳杆菌聚乳酸多孔微球制剂, 考察其体外性质。采用复乳-溶剂挥发法制备得到左旋聚乳酸多孔微球(poly-L-lactic acid porous microsphere, PLPM), 形态圆整, 大小均匀, 有开放及连通的多孔结构, 平均粒径为138.5 μm。在37 ℃将PLPM与LGG共孵育8 h, 得到高载菌率的鼠李糖乳杆菌多孔微球(LGG-loaded porous microsphere, LPM)。通过静电作用逐层将乙二醇壳聚糖(glycol chitosan, GCS) 和海藻酸钠(sodium alginate, SA) 包裹于LPM表面, 得到乙二醇壳聚糖和海藻酸钠包封的鼠李糖乳杆菌多孔微球制剂(layer-by-layer encapsulated LGG-loaded porous microsphere with GCS and SA, AGLPM)。体外实验证明, AGLPM可以耐受2 h pH 1.2的模拟胃液及pH 7.4的模拟肠液, 稳定性显著强于裸LGG。壳聚糖和海藻酸钠包裹的聚乳酸多孔微球是一种较好的益生菌剂型。

采用聚酰胺柱色谱、硅胶柱色谱、制备薄层色谱以及半制备高效液相色谱等分离技术, 对姜黄的95%乙醇提取物进行了分离纯化。随后, 运用高分辨质谱、红外、核磁共振等波谱技术对化合物进行了结构鉴定并通过计算ECD确定了新化合物的绝对构型。最终, 从姜黄中分离鉴定了2个没药烷型倍半萜, 分别为(7S)-1,3,5,10-没药烷四烯-3-硝基-9-酮(1) 和turmeronol A (2), 其中化合物1为新颖的硝基取代没药烷型倍半萜。

基于质谱成像法研究三七改善糖尿病视网膜病变(DR) 及干预角膜、玻璃体和视网膜代谢物的作用, 揭示三七改善DR作用机制。所有动物实验经北京中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号: BUCM-2023052204-2117)。采用链脲佐菌素(STZ) 诱导糖尿病(DM) 大鼠模型, 检测各组大鼠的空腹血糖(FBG) 和糖化血清蛋白(GSP) 含量, 应用免疫荧光染色法检测大鼠视网膜中闭合蛋白(occludin)、闭锁小带蛋白-1 (ZO-1) 表达水平; 采用空气动力辅助解吸电喷雾离子化质谱成像(AFADESI-MSI) 检测DM组和三七组大鼠眼球角膜、玻璃体、视网膜微区内源性代谢物, 通过主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA) 筛选DM组和三七组的差异代谢物, 分析各微区中差异代谢物的原位空间信息, 并通过京都基因与基因组百科全书(KEGG) 数据库分析相关代谢通路。结果表明, 与DM组比较, 三七组糖尿病大鼠FBG和GSP均有下降趋势, 视网膜中ZO-1、occludin表达增加(P < 0.001); AFADESI-MSI分析结果显示, 三七组角膜、玻璃体和视网膜微区共有34个差异代谢物, 其中三七回调13种差异代谢物。在视网膜微区, 三七显著回调溶血磷脂酰丝氨酸(18∶0)、磷脂酰乙醇胺(34∶2) 和磷脂酰丝氨酸(40∶7/42∶7); 代谢通路富集结果表明, 三七主要调控甘油磷脂代谢、糖基磷脂酰肌醇合成、烟酸和烟酰胺代谢以及甘油酯代谢途径。综上, 三七改善糖尿病大鼠血视网膜屏障(BRB), 其作用机制可能与甘油磷脂代谢密切相关, 本研究为三七改善DR的作用机制提供了科学依据, 展现了质谱成像技术应用于药理机制研究的潜力。

肺纤维化(pulmonary fibrosis, PF) 是一类预后极差、严重影响患者生存质量的肺部疾病, 其主要病理特征是肺泡壁周围组织瘢痕形成及增厚, 最终导致呼吸衰竭。目前, 美国食品药品监督管理局(Food and Drug Administration, FDA) 批准的PF治疗药物包括吡非尼酮和尼达尼布, 然而这两种药物仅能延缓疾病进程, 无法实现PF的逆转, 且二者均因价格昂贵以及多种不良反应导致临床应用受限。PF发病机制至今尚未完全阐明, 研究证明, 免疫细胞的异常激活和调控在PF中扮演着重要角色。本综述旨在探讨近年来免疫细胞在PF进程中的作用研究进展, 以期为新型免疫疗法的开发提供理论参考。